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微量熱涌動(dòng)主要功能與適用范圍介紹
來源:測試GO 時(shí)間:2022-11-08 09:54:40 瀏覽:4227次

微量熱涌動(dòng)(MST是一種表征生物分子特性的光學(xué)方法,是粒子在微觀溫度梯度中的定向運(yùn)動(dòng)。生物分子的質(zhì)量、電荷、水化層和構(gòu)象發(fā)生改變均可導(dǎo)致分子在溫度梯度場中運(yùn)動(dòng)速度的變化,這種變化可以用來分析分子間相互作用以及各種化學(xué)劑量學(xué)參數(shù)。

將波長為1480 nm 的紅外激光照射于熒光激發(fā)光路上,通過分色鏡照射到毛細(xì)管中的樣品,樣品中的水分子吸收紅外光發(fā)熱而形成溫度梯度。MST 儀器通過記錄激光器打開前、打開期間和打開后處于溫度梯度中的樣品內(nèi)部紅外激光照射區(qū)域的熒光變化情況,從而實(shí)現(xiàn)較短時(shí)間的測定。

微量熱涌動(dòng)

微量熱涌動(dòng)(MST主要功能:

1. 應(yīng)用于任何生物分子間的相互作用分析,獲得數(shù)據(jù)包括親和力、結(jié)合能量學(xué)(ΔG,ΔS,ΔH)、化學(xué)計(jì)量學(xué)、酶動(dòng)力學(xué)、結(jié)合位點(diǎn)、直接測量或在競爭性試驗(yàn)中研究抑制物親和力Ki等。

2. 可以任何溶液中分析分子間的相互作用(包括細(xì)胞裂解液、血清、含去污劑或有機(jī)溶劑等各種溶液),結(jié)合GFP/YFP/RFP融合蛋白則可以無需純化樣品,直接在細(xì)胞裂解液中直接測量分析。

3. 應(yīng)用于多組分反應(yīng)、協(xié)同或抑制因子的疊加效應(yīng)分析等。

4. 可以檢測蛋白樣品的聚集和分析人為操作帶來的誤差。

 

微量熱涌動(dòng)(MST適用范圍:蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)(包括抗原-抗體、分子伴侶-底物)、蛋白質(zhì)-核酸、核酸-核酸、蛋白-小分子(蛋白酶與抑制劑、細(xì)胞膜蛋白活性)、蛋白-肽、肽-肽等相互作用,比ITC能檢測更微小的相互作用。


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