亚洲清纯欧美自拍偷拍-91蜜臀视频国产-不卡二卡三卡四卡免费-日韩av伊人av-森泽佳奈在线中文字幕-91大神视频在线观看视频-japanese五十路熟妇-丰满熟女一区二区三视频-91亚洲一区二区三区,婷婷的五月在线,欧美少妇淫交视频,亚洲欧美另类综合图片

預(yù)存

登錄注冊

Document

當(dāng)前位置：文庫百科 ? 文章詳情

細(xì)胞增殖及毒性檢測的常見實驗方法

來源：時間：2024-09-30 10:05:50 瀏覽：7436次

細(xì)胞增殖及毒性檢測的常見實驗方法

細(xì)胞增殖及毒性檢測是生物醫(yī)學(xué)研究中的重要內(nèi)容，對于藥物篩選、毒理學(xué)研究等領(lǐng)域具有重要意義。

以下介紹幾種常見的細(xì)胞增殖及毒性檢測實驗方法：

一、MTT實驗（噻唑藍比色法）

1. 原理：MTT實驗是一種檢測細(xì)胞增殖的方法；MTT（3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴鹽）可被活細(xì)胞內(nèi)的線粒體酶還原成紫色結(jié)晶物甲簪，而死細(xì)胞無此功能；通過溶解結(jié)晶物，可測定吸光度，從而反映細(xì)胞增殖情況。

2. 方法：（1）將細(xì)胞接種于96孔板，加入不同濃度的待測物質(zhì)；（2）培養(yǎng)一定時間后，加入MTT溶液；（3）繼續(xù)培養(yǎng)4-6小時，棄去上清，加入DMSO溶解結(jié)晶；（4）酶標(biāo)儀測定570nm處的吸光度值。

二、CCK-8實驗（細(xì)胞計數(shù)試劑盒-8）

1. 原理：CCK-8實驗與MTT實驗類似，但其使用的試劑為WST-8（2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯偶氮)-5-(2,4-二硫唑基)）鹽；WST-8在細(xì)胞內(nèi)的脫氫酶作用下產(chǎn)生黃色的甲簪，吸光度值與活細(xì)胞數(shù)量成正比。

2. 方法：（1）將細(xì)胞接種于96孔板，加入不同濃度的待測物質(zhì)；（2）培養(yǎng)一定時間后，加入CCK-8溶液；（3）繼續(xù)培養(yǎng)1-4小時，酶標(biāo)儀測定450nm處的吸光度值。

三、Brdu實驗（5-溴脫氧尿嘧啶核苷酸實驗）

1. 原理：Brdu是一種類似胸腺嘧啶的核苷酸，可摻入DNA合成過程中；通過檢測Brdu的摻入量，可以反映細(xì)胞增殖情況。

2. 方法：（1）將細(xì)胞接種于96孔板，加入不同濃度的待測物質(zhì)；（2）培養(yǎng)一定時間后，加入Brdu溶液；（3）繼續(xù)培養(yǎng)一定時間，固定細(xì)胞，加入抗Brdu抗體；（4）酶標(biāo)儀測定450nm處的吸光度值。

四、克隆形成實驗

1. 原理：克隆形成實驗是通過統(tǒng)計克隆形成率來評價細(xì)胞增殖能力；克隆形成率越高，細(xì)胞增殖能力越強。

2. 方法：（1）將細(xì)胞接種于培養(yǎng)皿，加入不同濃度的待測物質(zhì)；（2）培養(yǎng)一定時間后，棄去上清，固定細(xì)胞，染色；（3）顯微鏡下計數(shù)克隆數(shù)，計算克隆形成率。

五、EdU實驗（5-乙炔基-2'-脫氧尿嘧啶核苷酸實驗）

1. 原理：EdU是一種新型的DNA標(biāo)記物，可替代Brdu進行細(xì)胞增殖檢測；EdU與DNA的親和力更高，檢測信號更穩(wěn)定。

2. 方法：（1）將細(xì)胞接種于96孔板，加入不同濃度的待測物質(zhì)；（2）培養(yǎng)一定時間后，加入EdU溶液；（3）繼續(xù)培養(yǎng)一定時間，固定細(xì)胞，加入熒光標(biāo)記的抗EdU抗體；（4）熒光顯微鏡下觀察細(xì)胞熒光強度。

六、LDH實驗（乳酸脫氫酶釋放實驗）

1. 原理：LDH是一種胞內(nèi)酶，當(dāng)細(xì)胞膜受損時，LDH會釋放到細(xì)胞外；通過檢測培養(yǎng)上清中的LDH活性，可以評估細(xì)胞毒性。

2. 方法：（1）將細(xì)胞接種于96孔板，加入不同濃度的待測物質(zhì)；（2）培養(yǎng)一定時間后，收集上清；（3）加入LDH底物，酶標(biāo)儀測定490nm處的吸光度值。

七、中性紅攝取實驗

1. 原理：中性紅是一種細(xì)胞活性染料，活細(xì)胞可將其攝入細(xì)胞內(nèi)；通過測定細(xì)胞內(nèi)中性紅的含量，可以評估細(xì)胞毒性。

2. 方法：（1）將細(xì)胞接種于96孔板，加入不同濃度的待測物質(zhì)；（2）培養(yǎng)一定時間后，加入中性紅溶液；（3）繼續(xù)培養(yǎng)一定時間，棄去上清，溶解細(xì)胞內(nèi)的中性紅；（4）酶標(biāo)儀測定540nm處的吸光度值。

上一篇：氧氮氫分析儀的特點優(yōu)勢與應(yīng)用領(lǐng)域分析

下一篇：預(yù)存特惠 || 預(yù)存贈高額測試費，最高享19%加贈

相關(guān)文章

BET氣體吸附原理及其技術(shù)發(fā)展

2025-02-21

熱重分析（TG-DTG）曲線的幾種解析方法

2023-12-26

一文詳解掃描電子顯微鏡(SEM)的工作原理及應(yīng)用技術(shù)

2023-10-08

一文詳細(xì)介紹he染色的基本原理、實驗步驟及注意事項

2023-11-23

接觸角測試（CA）的原理、樣品制備要求及實際應(yīng)用

2023-11-16

?細(xì)胞熱遷移分析技術(shù)cetsa的具體原理和實驗流程

2024-11-29

項目推薦/Project

克隆形成

細(xì)胞毒性/增殖

熱門文章/popular

基礎(chǔ)理論丨一文了解XPS（概念、定性定量分析、分析方法、譜線結(jié)構(gòu)）

手把手教你用ChemDraw 畫化學(xué)結(jié)構(gòu)式：基礎(chǔ)篇

晶體結(jié)構(gòu)可視化軟件 VESTA使用教程（下篇）

電化學(xué)實驗基礎(chǔ)之電化學(xué)工作站篇（二）三電極和兩電極體系的搭建和測試

【科研干貨】電化學(xué)表征：循環(huán)伏安法詳解（上）

【科研干貨】電化學(xué)表征：循環(huán)伏安法詳解（下）

微信掃碼分享文章

感谢您访问我们的网站，您可能还对以下资源感兴趣：

亚洲清纯欧美自拍偷拍-91蜜臀视频国产-不卡二卡三卡四卡免费-日韩av伊人av-森泽佳奈在线中文字幕-91大神视频在线观看视频-japanese五十路熟妇-丰满熟女一区二区三视频-91亚洲一区二区三区,婷婷的五月在线,欧美少妇淫交视频,亚洲欧美另类综合图片 WmOrt

亚洲清纯欧美自拍偷拍-91蜜臀视频国产-不卡二卡三卡四卡免费-日韩av伊人av-森泽佳奈在线中文字幕-91大神视频在线观看视频-japanese五十路熟妇-丰满熟女一区二区三视频-91亚洲一区二区三区亚洲清纯欧美自拍偷拍-91蜜臀视频国产-不卡二卡三卡四卡免费-日韩av伊人av-森泽佳奈在线中文字幕-91大神视频在线观看视频-japanese五十路熟妇-丰满熟女一区二区三视频-91亚洲一区二区三区亚洲清纯欧美自拍偷拍-91蜜臀视频国产-不卡二卡三卡四卡免费-日韩av伊人av-森泽佳奈在线中文字幕-91大神视频在线观看视频-japanese五十路熟妇-丰满熟女一区二区三视频-91亚洲一区二区三区