亚洲清纯欧美自拍偷拍-91蜜臀视频国产-不卡二卡三卡四卡免费-日韩av伊人av-森泽佳奈在线中文字幕-91大神视频在线观看视频-japanese五十路熟妇-丰满熟女一区二区三视频-91亚洲一区二区三区,婷婷的五月在线,欧美少妇淫交视频,亚洲欧美另类综合图片

預存
Document
當前位置:文庫百科 ? 文章詳情
深度解析:免疫印跡實驗挑戰(zhàn)傳統(tǒng)蛋白質認知
來源: 時間:2024-06-12 09:27:49 瀏覽:5001次

深度解析:免疫印跡實驗挑戰(zhàn)傳統(tǒng)蛋白質認知

 

免疫印跡實驗,又稱為西方印跡實驗(Western Blotting),是一種用于檢測特定蛋白質存在與表達水平的技術,該技術自20世紀70年代問世以來,已經(jīng)在生物醫(yī)學研究領域發(fā)揮了重要作用;免疫印跡實驗不僅能夠驗證蛋白質的表達,還可以分析蛋白質的翻譯后修飾、鑒定蛋白質的亞細胞定位以及監(jiān)測蛋白質的動態(tài)變化。

一、實驗原理

免疫印跡實驗基于抗原-抗體反應的原理,結合凝膠電泳分離蛋白質和轉移技術,將蛋白質從凝膠中轉移到固相支持物(如硝酸纖維素膜)上;轉移到膜上的蛋白質可以與特異性抗體結合,通過顯色反應,從而實現(xiàn)對特定蛋白質的檢測。

 

二、實驗步驟

1. 蛋白質樣品制備:首先,需要提取細胞或組織中的總蛋白質,并對其進行定量。

2. 蛋白質分離:將制備好的蛋白質樣品進行凝膠電泳分離;常用的分離膠有SDS-PAGE(聚丙烯酰胺凝膠電泳)Criterion TM Pre-Cast Slab Gel

3. 蛋白質轉移:將分離后的蛋白質從凝膠轉移到硝酸纖維素膜上;常用的轉移方法有濕轉和半干轉。

4.  blocking:將轉移好的膜用5%的脫脂奶粉或BSA溶液進行 blocking,以減少非特異性背景。

5. 免疫雜交:將膜與特異性一抗進行雜交,然后用辣根過氧化物酶或堿性磷酸酶標記的二抗進行檢測。

6. 顯色:使用化學發(fā)光劑或酶底物進行顯色,觀察特定蛋白質的表達。

 

三、應用

1. 發(fā)現(xiàn)新的蛋白質:免疫印跡實驗可以幫助研究者發(fā)現(xiàn)新的蛋白質,尤其是那些在生物體中表達量較少的蛋白質;通過免疫印跡實驗,研究者可以驗證這些新發(fā)現(xiàn)的蛋白質是否在特定細胞類型或生理狀態(tài)下表達,進而深入研究其功能和作用機制。

2. 分析蛋白質的翻譯后修飾:翻譯后修飾是蛋白質功能調控的重要方式;免疫印跡實驗可以分析蛋白質在不同翻譯后修飾狀態(tài)下的表達水平,從而揭示蛋白質功能的調控機制。

3. 研究蛋白質的亞細胞定位:免疫印跡實驗可以監(jiān)測蛋白質在細胞不同部位的表達情況,有助于研究蛋白質的亞細胞定位及其在細胞內傳遞信息的作用。

4. 監(jiān)測蛋白質的動態(tài)變化:免疫印跡實驗可以檢測蛋白質在不同生理或病理狀態(tài)下的表達水平變化,從而揭示蛋白質在生物體內的動態(tài)調控過程。

5. 驗證蛋白質相互作用:免疫印跡實驗可以用于驗證蛋白質之間的相互作用;通過免疫印跡實驗,研究者可以檢測相互作用蛋白質在細胞內的共表達情況,進而探討它們在生物體中的功能關聯(lián)。

評論 / 文明上網(wǎng)理性發(fā)言
12條評論
全部評論 / 我的評論
最熱 /  最新
全部 3小時前 四川
文字是人類用符號記錄表達信息以傳之久遠的方式和工具?,F(xiàn)代文字大多是記錄語言的工具。人類往往先有口頭的語言后產(chǎn)生書面文字,很多小語種,有語言但沒有文字。文字的不同體現(xiàn)了國家和民族的書面表達的方式和思維不同。文字使人類進入有歷史記錄的文明社會。
點贊12
回復
全部
查看更多評論
相關文章

BET氣體吸附原理及其技術發(fā)展

2025-02-21

熱重分析(TG-DTG)曲線的幾種解析方法

2023-12-26

一文詳解掃描電子顯微鏡(SEM)的工作原理及應用技術

2023-10-08

一文詳細介紹he染色的基本原理、實驗步驟及注意事項

2023-11-23

接觸角測試(CA)的原理、樣品制備要求及實際應用

2023-11-16

?細胞熱遷移分析技術cetsa的具體原理和實驗流程

2024-11-29

項目推薦/Project
SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳

SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳

蛋白印跡實驗(WB)

蛋白印跡實驗(WB)

熱門文章/popular

基礎理論丨一文了解XPS(概念、定性定量分析、分析方法、譜線結構)

手把手教你用ChemDraw 畫化學結構式:基礎篇

晶體結構可視化軟件 VESTA使用教程(下篇)

電化學實驗基礎之電化學工作站篇 (二)三電極和兩電極體系的搭建 和測試

【科研干貨】電化學表征:循環(huán)伏安法詳解(上)

【科研干貨】電化學表征:循環(huán)伏安法詳解(下)

微信掃碼分享文章
沈阳市| 涡阳县| 邮箱| 峨边| 广安市| 三门县| 景宁| 石城县| 长兴县| 澄迈县| 鸡西市| 即墨市| 双桥区| 洪湖市| 乃东县| 石嘴山市| 大名县| 武山县| 屏东市| 达日县| 富顺县| 张家界市| 左贡县| 吉水县| 和平区| 呈贡县| 诏安县| 龙川县| 松桃| 林西县| 北流市| 苗栗市| 和林格尔县| 乌什县| 南和县| 阿合奇县| 阿荣旗| 海晏县| 松原市| 尉犁县| 福泉市|
+

你好,很高興為您服務!

發(fā)送