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TEM測試如何低速離心取材以及送樣方法？

來源：測試GO 時間：2022-09-16 14:51:47 瀏覽：2402次

在我們進行TEM測試時，低速離心取材以及送樣是實驗的重要的一部分，下面教大家一個所有類型均適用的細胞樣品操作方法：

動物組織的TEM圖

1. 最好刮取細胞，收集在離心管中，1500 rpm離心5 ~ 10 min（初次離心參數(shù)可按自己的經(jīng)驗調整，目的是不損傷細胞結構的情況下去掉培養(yǎng)液成分）。

2. 棄上清，加入常溫（平時固定液4℃保存，臨用前拿出復溫到室溫或體溫）的3%戊二醛固定液，重懸細胞。常溫固定2 min。

3. 轉移至1.5 ml尖底EP管，2000 rpm離心10 min。此步離心后，細胞應為約半顆綠豆大小。

4. 用吸管小心棄上清，加入室溫的0.1M PB或等滲PBS，重懸細胞。再以1000 rpm離心5 ~10 min。

5. 以相同條件重復上述重懸、離心步驟，再次漂洗細胞（不要偷懶，要洗第二遍）。

6. 用吸管小心棄上清，加入預熱到40℃的GT2(實驗室提供的特殊固定液)專用溶液重懸細胞（輕輕搖勻或吹吸均可，不要有肉眼可見的大塊）；立即以3000 rpm離心10 min。

7. 用吸管盡快小心棄上清；然后密閉管蓋，轉入4℃靜置10 min（嚴禁結冰）。

8. 沿管壁緩慢加入固定液，不要沖擊細胞團，靜置30 min后可送樣。

重點：

（1）固定和各項操作都是室溫條件，GT2(實驗室提供的特殊固定液)本身要預熱到40℃，GT2凝結前沒有需要預冷的步驟。

（2）取材完成后，在4℃保存，保存和運輸期間嚴禁結冰（太靠近冰箱后壁或冰袋運輸都可能使樣品結冰。冬季寧可常溫送樣）。

（3）觀察細胞連接的實驗，嚴禁用消化的方法收集細胞。

測試狗

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